Western Blot Rapid Transfer Buffer
(20X)
Catalog Number:ED510
01/產品概述
立譜沃生物的Western Blot快速轉膜液(20X),即Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X),是一種20倍濃縮的安全無毒害的用于Western Blot實驗的快速濕轉緩沖液。本產品采用全新的快速轉印配方,15-30 min即可高效、快速地將蛋白轉移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。本產品為20倍濃縮(20X)溶液,使用前需要用適當水和乙醇稀釋至1X。配制過程中,可用無水乙醇替代甲醇,無需使用劇毒的甲醇等試劑,安全無毒害。轉膜全程產熱小,無需外置冰浴。
02/產品組分
組分 | ED510 |
Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) | 500 mL |
03/保存條件
常溫運輸。室溫干燥處保存,有效期12個月。
04/產品特點
1. 轉印快速、高效——500mA恒流轉膜15-20分鐘或400mA恒流轉膜約20-30分鐘,即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉移至印跡膜上,轉膜效果好。
2. 無需外置冰浴,僅使用內置冰盒即可——轉膜過程產熱非常小,無需外置冰浴,減少蛋白損失。相同的條件下使用傳統的轉膜液更容易導致過度發熱,而在發熱程度相似的情況下傳統轉膜液需要轉膜更長時間。
3. 使用安全——可用無水乙醇替代甲醇,選擇靈活,可避免使用有毒的甲醇等試劑。
05/適用范圍
Western Blot快速轉膜液(20X)適用于Western Blot濕轉法轉膜。兼容各種常見凝膠,例如Laemmli膠、預制膠、FastPAGE、Bis-Tris膠等。
06/使用說明
一、Western Blot快速轉膜液(1X) 1000 mL的配制方法:
取Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) 50mL加入850 mL超純水中,加入100 mL 無水甲醇(或無水乙醇),混勻,4℃保存備用。
二、參考轉膜條件:
根據實驗條件及儀器的不同,轉膜條件會有差別。通常條件下,轉膜電流可設置為電泳儀允許的最大電流。具體轉膜條件可根據電泳儀電流限定、凝膠厚度、分離膠濃度、目的蛋白分子量做出適當調整。參考轉膜條件如下:
1. 梯度膠
濃度4%~15%,厚度0.75 mm,恒流400 mA,30 min以內所有條帶均可完成轉膜。
2. 普通PAGE膠
轉膜效率與分離膠濃度及厚度有關,對于各濃度1.0 mm 凝膠,采用恒流400 mA,按如下時長即可將150 kDa 以下蛋白轉印*,若蛋白分子量大于150 kDa,需延長轉膜時間5-10 min。
分離膠濃度 | 6% | 7.5% | 10% | 12.5% |
推薦轉膜時間 | 20 min | 25 min | 30 min | 35 min |
Ø PAGE膠厚度越厚,轉膜效率越低。對于厚度1.5 mm的凝膠,可將上表推薦的轉膜時間相應延長5-10 min。
07/注意事項
1. PVDF膜使用前需用無水甲醇潤濕30秒以上進行活化。
2. 轉膜液稀釋為1x后請盡快使用,應避免長時間存放于室溫,短期內保存建議放置于4℃冰箱。
3. 轉膜時,如果出現報錯而停止,需要根據情況查看是否是電壓或電流過載、轉膜液過多或過少、轉膜槽短路或斷路等異常情況。
4. 回收的轉膜液可重復使用1-2次,但為取得更好的轉膜效果,不建議多次重復使用,以免影響轉膜效率。
5. 為了您的健康安全,請規范操作,穿戴實驗服與手套開展實驗。
6. 本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及治療。
08/其他相關產品
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
Western Blot CBB Protein Safe Stain Solution (Decolorization Free, 1X) | ED410-1 | 100 mL |
ED410-5 | 500 mL | |
Western Blot Rapid Blocking Buffer (Protein Free, 1X) | ED610-1 | 100 mL |
ED610-5 | 500 mL | |
Western Blot Stripping Buffer (1X) | ED710-1 | 100 mL |
ED710-5 | 500 mL | |
Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer (1X) | ED810-1 | 100 mL |
ED810-5 | 500 mL | |
Western Blot Ultra Sensitive ECL Chemiluminescent Substrate Kit | ED910-1 | 100 mL |
ED910-5 | 500 mL |