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基因過表達穩轉細胞株技術背景
研究某個基因的功能常用的手段是在宿主細胞中過表達(over expression)或者通過RNAi 敲減(knock-down)該基因?;蜻^表達是指通過在細胞內提高特定基因的表達水平,從而實現基因的功能增強(gain of function)?;蜻^表達作為一種傳統的分子生物學技術至今依然在生物學研究中發揮著重要作用,常規手段有瞬時轉染和篩選穩定細胞株。
篩選出該基因的過表達穩定細胞株會給您后續實驗帶來極大的便利,讓實驗結果具有高度的可重復性。有了穩定細胞株,后期的Co-IP、Pull-Down、亞細胞定位、表型分析等實驗都會變得非常便利。
慢病毒幾乎可以感染所有種類的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達。構建穩定細胞株的基本原理就是利用慢病毒的特性,將外源DNA克隆到具有某種抗性的慢病毒載體中,通過包裝慢病毒并感染目的細胞,慢病毒載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選,就可以得到穩定表達目的蛋白的細胞株,適合在各類細胞中穩定過量表達不同大小的外源基因。
立譜沃生物“基因過表達穩轉細胞株"技術服務介紹
立譜沃生物建立了一套成熟穩定的慢病毒包裝體系,針對多種不同細胞類型(包括難轉染細胞),建立了標準的轉基因技術服務體系,為您提供基因過表達穩轉細胞株的構建服務。您只需提供目的基因和需要構建的細胞系,我們將按照您的要求完成目的基因過表達細胞株的構建和檢測,為您提供高質量的基因過表達穩轉細胞株。